Ione di ceppo e attività della cellulasi
Selezione del ceppo di Cellulasi
La selezione del ceppo è un lavoro fondamentale inCellulasiproduzione, e molti esperti in patria e all'estero hanno condotto ricerche approfondite. Al fine di produrre prodotti di alta qualitàCellulasiWang Jialin et al. (1996), sulla base dell'esperienza acquisita a livello nazionale ed estero, hanno introdotto successivamente Trichoderma viride 10, Trichoderma viride Sn-91014, Aspergillus niger NT-15 e Aspergillus niger XX-15A. Su questa base, sono stati utilizzati metodi di mutagenesi fisica e chimica, come radiazioni ultraviolette, radiazioni elettromagnetiche specifiche, acceleratore lineare e nitrosoguanidina, per ottenere i ceppi ad alta resa NT15-H, NT15-H1, XT-15H e XT-15H1. L'attività di coltura solida di Trichoderma NT-15H è stata testata dal Centro di Supervisione e Collaudo della Qualità Alimentare del Ministero dell'Industria Leggera presso la stazione di Nanchino, e l'attività della carta da filtro è risultata pari a 3670 u/g.Cellulasi L'attività dell'enzima C1 era 24460u/g eCellulasi L'attività enzimatica Cx era di 1800 u/g, raggiungendo un livello avanzato a livello internazionale. Questo ceppo ha prestazioni stabili nella produzione industriale. Zhang Linghua et al. (1998) hanno utilizzato Trichoderma harzianum W-925, J-931 e hanno ottenuto il Wu-932.Cellulasi ceppo con elevata attività enzimatica dopo mutagenesi composita con dietil solfato al 2% e radiazione ultravioletta (15W, 30cm, 2min).Cellulasi Il ceppo presentava un potere saccarificante CMC di 2975 e un'attività enzimatica su carta da filtro di 531, rispettivamente superiori del 100% e dell'81% rispetto al ceppo di partenza W-925. Wang Chengshu et al. (1997) del Feed Additive Technology Service Center del Ministero dell'Industria Chimica hanno utilizzato il ceppo Trichoderma reesei A3 del centro per sottoporsi a mutagenesi UV e con composti nitrosoguanidinici. Le spore trattate sono state inoculate su una piastra a doppio strato di fibre, coltivate a 30 °C per 5-8 giorni e lasciate a 15 °C per 7-10 giorni. Singole colonie con diametro del cerchio trasparente e diametro della colonia maggiori sono state selezionate per la fermentazione allo stato solido in un pallone triangolare e quindi sottoposte a screening per ottenere il ceppo Trichoderma reesei 91-3 con elevataCellulasiattività.
ILCellulasiI ceppi sono inclini alla degradazione e la loro capacità di produzione enzimatica diminuisce significativamente dopo la degradazione. Ciò può essere dovuto a tre ragioni:
①Il ceppo selezionato tramite mutagenesi subisce una mutazione revertente.
②Mutazione negativa naturale.
③La conservazione a lungo termine a bassa temperatura di ceppi batterici può portare alla crescita di ife secondarie sui conidi e la vitalità dei conidi formati dalle ife secondarie è debole, il che potrebbe essere la causa principale della degradazione batterica. Per evitare la degradazione diCellulasiceppi, Zhang Linghua et al. (1998) hanno riferito di utilizzare provette di sabbia per preservare i ceppi. La sabbia e il terreno che devono essere setacciati e puliti vengono miscelati in un rapporto 3:2 e confezionati in provette. Vengono sterilizzati tre volte con una pressione di 1 kg/cm² per 30 minuti. Il ceppo batterico inclinato da preservare viene preparato in una sospensione di spore da 1000 ml. 0,5 ml vengono iniettati in ciascuna provetta di sabbia, agitata bene e conservata in un essiccatore sotto vuoto contenente CaCl² anidro. Dopo il test,Cellulasi l'attività enzimatica è rimasta sostanzialmente invariata nei 121 giorni testati; Il tempo perCellulasi il tempo necessario per ridurre l'attività enzimatica del 50% è stato esteso da 60 giorni, utilizzando metodi convenzionali, a 160 giorni, rallentando significativamente la velocità di degradazione batterica.
Fattori che influenzanoCellulasiattività
Il pH ottimale perCellulasiè generalmente compreso tra 4,5 e 6,5. Il gluconolattone può inibire efficacementeCellulasi, e gli ioni di metalli pesanti come gli ioni di rame e mercurio possono anche inibireCellulasiTuttavia, la cisteina può eliminare i loro effetti inibitori e persino attivarli ulteriormenteCellulasiI tessuti vegetali contengono sostanze naturaliCellulasiinibitori; Può proteggere le piante dal decadimento causato dalla muffa, e questi inibitori sono composti fenolici. Se c'è un'elevata attività ossidasica nei tessuti vegetali, può ossidare i composti fenolici in composti chinonici, che possono inibireCellulasi.
